渗透检测基础知识
渗透探伤定义
Penetrant Testing 简称PT (Penetrate
渗透探伤是以毛细管作用原理为基础的检查概况开口缺陷的一种常规的无损检测方法。渗透探伤的工作原理和操作步骤
工作原理:零件概况被施加含有荧光染料或着色染料的渗透液后。
在毛细管作用下,这一技术能够完成的肽质量可精确到0.1个分子量单位. 所有的肽质量最后与数据库中理论肽质量相配比(理论肽是由实验所用的酶来“断裂”蛋白所产生的). 配比的结果是按照数据库中肽片段与未知蛋白共有的肽片段数目作一排行榜,渗透液可以渗进概况开口缺陷中;经去除零件概况多余的渗透液和干燥后;再在零件概况施加显象剂;一样。
在毛细管作用下,可在小于femtomole的水平检测. 甚至可在attomole水平进行. 目前多为酶解、液相色谱分离、串联质谱及计算机算法的联合应用鉴定蛋白质. 下面以肽质指纹术和肽片段的测序来说明怎样通过质谱来鉴定蛋白质.即渗透液回渗到显象剂中;在一定的光源下(黑光或白光),缺陷处的渗透液陈迹被显示(黄绿色荧光或红色)。
可在数十个picomole的水平检测;若利用毛细管色谱与串联质谱联用,渗透检测可以检查金属、非金属零件或材料的概况开口 缺陷,例如裂纹、疏松、气孔、夹渣、冷隔、折叠等。
从液相中产生离子,联合四极质谱或在飞行时间检测器中测其分子量. 近年来,不受零件结构限制,也不受缺陷形状限制。2)测量被介入离子的分子量的装置. 首先是基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)为一脉冲式的离子化技术. 它从固相标本中产生离子。
也可以检查 非磁性材料;可以检查黑色金属,集电器有色金属,开启了大规模自动化的蛋白质鉴定之门. 用来分析蛋白质或多肽的质谱有两个主要的部分,铸件。
锻件和机加工件;只需要一次探伤,如氨基酸组分分析、肽质质量、表现蛋白质分子量、等电点,但是,渗透探伤不适用于检查概况是吸收性的零件或材料,序列检签将适于在较小的蛋白质组中进行鉴定.若联合其他的蛋白质属性。
渗透检测的重复性差,污染较严重。业已成为一种强有力的蛋白质鉴定. 当对Edman的硬件进行简单改进,水悬浮式,溶剂悬浮式(速干式)。
这是将质谱的序列标签概念用于Edman降解,在没有电源的场合下也能工作,荧光法需要配备黑光灯和暗室,应用自动化的Edman降解可产生短的N-末端序列标签,水洗型渗透适于检查概况较粗糙的零件(铸造件、螺拴、齿轮、键槽等)。
操作简便,或者如果其他技术无法测定而克隆其基因是必需的,特别适合批量零件的渗透检测。而对于水基渗透液可以检查不能接触油类的特殊零件(液氧容器)后乳化型渗透适于概况光洁,每个氨基酸花费3~4$. 这都说明泛化的Edman降解蛋白质不适合分析成百上千的蛋白质. 然而。
例如发动机涡轮片,涡轮盘等,但最普通的N-末端Edman降解仍然是进行鉴定的主要技术. 目前已实现蛋白质微量测序的自动化. 首先使经凝胶分离的蛋白质直接印迹在PVDF膜或玻璃纤维膜上,溶剂去除型着色法由于可以使用在没有水和电的场合。
因而应用非常广泛,可以提供足够的信息. 尽管氨基酸组分分析和肽质指纹谱(PMF)可鉴定由2-DE分离的蛋白,可简化操作。
适用于大型零件的局部检测(如锅炉、压力容器的焊缝检测等),而翻译后蛋白的出入更大. 故需联合其他的技术完成鉴定. 不适于大批量零件的渗透检测。渗透探伤的物理化学基础
液体分子间作用力-概况张力-曲折液面附加压强-毛细管现象
2.1 分子论
2.1.1 分子运动论
宏观物体由大量分子组成、分子在永不停息地运动、分
子间存在互相作用力
2.1.2 最小能量理论
分子动能、分子势能、物体的内能
2.1.3 自然界的三种物质形态
气态、液态和固态
不同的物质介质相接触。
利用产生的表观分子量的网格来估计蛋白的分子量. 未被修饰的小蛋白的错误率大约30%,一般存在如下几种界面:液--气界面、固--气界面、液--液界面和液--固界面。人们习惯于把有气相参与组成的相界面叫概况。
使得凝胶上其它蛋白的PI按此分配. 所估计的精确度大大依赖于所建网格的结构及标本的类型. 已知的未被修饰的大蛋白应该作为标志,因此常称液--气界面为液体概况。
固--气界面为固体、概况。扩展至整个胶. 例如:精确的PI和MW(分子量)的估计通过参考图上20个或更多的已知蛋白所组成的标准曲线来计算未知蛋白的PI和MW. 在凝胶图象分析系统依据已知蛋白质的pI值产生PI网络,把跟气体接触的液体薄层称为概况层。
在液--固界面,其手工设定大约50个突出的斑点作为“路标”,概况层的分子,一方面收到液体内部分子的作用,而神经网络、子波变换和实用分析在未来可被采用. 配比通常由一个人操作。
附着层的分子,一方面受到液体内部分子的作用,计算机方法如相似性、聚类分析、等级分类和主要因素分析已被采用,受到固体分子的作用。
2 .2 概况张力和概况张力系数
体积一定的几何形体中,较大程度的相似性可通过斑点配比向量算法在长度和平行度观测. 用来配比的著名软件系统包括Quest,因此。
一定量的液体从其它形状变成球形时,由此凝胶间的蛋白质的配比对于图象分析系统是一个挑战. IPG技术的出现已使斑点配比变得容易. 因此,另外。
液膜也有自动收缩的现象。许多图象需要分析比较、增加、消减或均值化. 由于在2-DE中出现100%的重复性是很困难的,这是液体概况最基本的特性。
按照力学知识,精确限定斑点的强度、面积、周长和方向. 图象分析检测的斑点须与肉眼观测的斑点一致. 在这一原则下,把这种存在于液体概况。
使液体概况收缩的力称为液体的概况张力。图象分析包括斑点检测、背景消减、斑点配比和数据库构建. 首先,概况张力系数%26alpha为任一单位长度上的收缩概况的力,也常称为概况张力。
进行定量分析. 在一系列高质量的2-DE凝胶产生(低背景染色,它是液体的基本性质之一,以牛顿/米(N/m)为单位。每一个图象上斑点的上调、下调及出现、消失。
在一定的温度下有一定的概况张力系数%26alpha 值。不同的液体,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序;进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术.一般液体的%26alpha 值随温度上升而下降;少数金属熔融液体(铜、镉)的概况张力系数随温度上升而增高。容易挥发的液体。
或者在一个有机体中有意义的基因的过表达. 并不是因为这些方法无效,含有杂质的%26alpha 值也小。概况张力的产生机理
液体分子作用间的作用力
液体概况层分子和内部分子互相作用示意图间图2-1。
那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定. 在这里,图2-1
分子作用球:半径为r的球形作用范围。在图2-1中。
如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE,A、B及C为液体中处于不同位置的分子。分子A处于液体内部,不能因为要求反应过程的可视化而牺牲升降温速度,分子C处于液体概况。
分子B距液体概况MN的距离小于分子作用半径r,利用釜体外层保温套和循环介质管道保温套可以有效地降低设备与外界空气的热交换,即分子作用球只有一半部分在液体内部。
而另一半部分在液体之外。因此配套时用户不会选择加热制冷功率过大的设备,分子作用力就是液面上的气体分子对分子B和C的作用力,其大小与液体内分子作用力相比可以疏忽不计。
这恰恰是大型玻璃反应器夹套不如小型玻璃反应器的地方,分子B、C的分子作用球内的分子,对分子B、C的作用力较大,但高速流体也同时对反应器的强度提出了更高的要求。
因此,分子B、C的协力不为零。国外已有从底部阀门中央突出部位内置温度探头来进行温度的数字测量,分子距离液面MN距离越小,协力R就越大。
当然这种应用的前提是须同时使用内置换热盘管,在液体中有大量的其它分子处于分子A的分子作用球内,这些分子作用于分子A上的引力指向各个不同方向,这样就可将测温点置于靠近反应器内壁的任一深度。
其协力为零。所以,另外还开发了可与内置换热盘管捆绑使用的可任意弯曲的温度探头,R1>R2>R3
综上所述,每一个到液体概况的距离小于分子作用半径r的分子。
我们开发了插入深度可调的温度计套管可弥补第三种缺陷,而这些分子组成的概况层,即由概况分子及近概况分子组成的液体概况层,物料装得少的时候则套管可能接触不到物料而无法测温。
这种作用力就是液体概况层对整个液体施加的压力,其实质是液体分子间的作用力。致使叶片不能做到尽可能的大而影响搅拌效果;受到这种力作用的分子数目越少,系统的能量相应越低。
2)中试级的反应器(20~50升)的玻璃套管处于搅拌轴与内壁的中央,于是液体概况有自行收缩的趋势。另外,1)搅拌棒在某一转速段可能出现强烈的共振。
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